
詳細介紹
| 品牌 | Fd Neuro Tech | 貨號 | PK401 | 
|---|---|---|---|
| 規格 | kit | 供貨周期 | 現貨 | 
| 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥,綜合 | 
一、基礎信息
- 貨號:PK401
- 英文名稱:Rapid GolgiStain™ Kit
- 中文名稱:快速高爾基染色試劑盒
- 規格:kit
本試劑盒為科研級產品,包含染色全流程所需試劑及耗材,適用于哺乳動物腦組織切片、原代神經元培養及細胞爬片的高爾基體染色。具體組分包括固定液、染色液A、染色液B、顯色底物、洗滌緩沖液及封片劑,可滿足30-50次實驗需求。
- 品牌:FD Neuroo Technologies
- 適用領域:神經科學、藥物研發及發育生物學研究,專用于神經元和膠質細胞的高爾基體形態學分析。
二、產品概述
Rapid GolgiStain™ Kit 是基于改良Golgi-Cox技術的創新性染色試劑盒,旨在解決傳統高爾基染色法耗時長、操作復雜、染色率低等痛點。通過優化試劑配方與工藝流程,本產品將染色周期縮短至1.5-2小時(傳統方法需6-8小時),同時顯著提升染色特異性與信號穩定性。其核心優勢包括:
1. 快速高效:全流程僅需1.5-2小時,支持高通量樣本處理。
2. 高靈敏度:可清晰顯示直徑≥5μm的神經元突觸結構,樹突棘分辨率達0.2μm。
3. 兼容性廣:適用于冷凍切片、振動切片、原代神經元培養及細胞爬片。
4. 穩定性強:染色結果在避光條件下可保存6個月,無褪色或背景干擾。
5. 安全性優化:采用低毒試劑配方,操作安全性顯著提升。
三、成分組成與技術參數
1. 試劑組分
- 固定液:由4%多聚甲醛與0.2%戊二醛組成的混合溶液,用于快速固定細胞結構,防止高爾基體形態降解。
- 染色液A:含銀氨絡合物與氧化劑,選擇性沉積銀顆粒于高爾基體膜表面,增強結構對比度。
- 染色液B:含還原劑(如對苯二酚)與穩定劑,催化銀離子還原為金屬銀,形成高分辨率黑色沉淀。
- 顯色底物:含鎳鹽與緩沖體系,優化顯色反應速率與終點控制。
- 洗滌緩沖液:pH 7.4磷酸鹽緩沖液(PBS),用于去除未結合試劑,減少背景干擾。
- 封片劑:含抗熒光淬滅劑的甘油凝膠,適用于長期顯微鏡觀察。
2. 技術參數
- 染色時間:
- 固定:15分鐘(室溫避光)。
- 染色:45分鐘(避光)。
- 顯色:10分鐘(避光)。
- 樣本兼容性:
- 腦組織切片:厚度50-100μm,推薦使用振動切片機或冷凍切片機制備。
- 原代神經元培養:培養3-7天的神經元,貼壁狀態良好。
- 細胞爬片:需經多聚賴氨酸預處理以增強細胞貼壁。
- 檢測靈敏度:
- 高爾基體結構:可檢測直徑≥5μm的完整結構。
- 樹突棘:分辨率達0.2μm,支持單細胞水平分析。
- 保存條件:
- 試劑:2-8℃避光保存,避免冷凍,有效期12個月。
- 封片劑:-20℃冷凍保存,避免反復凍融。
四、使用方法
1. 樣本制備
- 腦組織切片:
1. 實驗動物經深度麻醉后快速取腦,避免機械損傷。
2. 用預冷PBS沖洗表面血液,轉移至含固定液的容器中,室溫固定15分鐘。
3. 棄固定液,PBS漂洗3次(5分鐘/次)。
- 原代神經元培養:
1. 棄培養基,PBS輕柔沖洗細胞2次。
2. 加入預冷4%多聚甲醛固定液,室溫固定15分鐘。
2. 染色流程
1. 固定:
- 棄PBS,加入固定液(100μL/樣本),室溫孵育15分鐘。
- 棄固定液,PBS漂洗3次(5分鐘/次)。
2. 染色液A處理:
- 加入染色液A(100μL/樣本),避光孵育45分鐘(室溫)。
- 棄染色液A,PBS漂洗3次(5分鐘/次)。
3. 染色液B處理:
- 加入染色液B(100μL/樣本),避光孵育10分鐘(室溫)。
- 棄染色液B,PBS漂洗3次(5分鐘/次)。
4. 顯色:
- 加入顯色底物(50μL/樣本),避光孵育10分鐘(室溫)。
- 棄顯色液,PBS漂洗3次(5分鐘/次)。
5. 封片:
- 滴加封片劑(50μL/樣本),蓋上蓋玻片,室溫固化1小時。
3. 顯微鏡觀察
- 使用普通光學顯微鏡(400×放大倍數)觀察高爾基體結構。
- 典型染色結果:高爾基體呈黑色顆粒狀,突觸結構清晰可見。
五、注意事項
1. 操作安全:
- 染色液A含銀鹽,避免直接接觸皮膚或吸入氣溶膠。
- 實驗全程需佩戴手套及護目鏡,建議在化學通風櫥內操作。
2. 樣本處理:
- 組織切片厚度需嚴格控制在50-100μm,過厚會導致染色不均。
- 固定時間不可超過20分鐘,否則影響染色特異性。
3. 試劑保存:
- 染色液B需避光保存,開封后建議分裝冷凍以延長有效期。
4. 質量控制:
- 每批次試劑附帶陽性對照樣本(含已知高爾基體密度的細胞系),用于驗證染色效果。
六、應用場景
1. 神經退行性疾病研究:
- 檢測阿爾茨海默病、帕金森病模型中神經元高爾基體碎裂程度,評估疾病進展。
2. 藥物篩選:
- 評估化合物對神經元分泌功能的影響(如鋰鹽對雙相情感障礙模型的療效)。
3. 發育生物學:
- 觀察胚胎期神經元遷移過程中高爾基體動態變化,揭示神經發育機制。
4. 環境毒理學:
- 分析重金屬暴露對神經元高爾基體超微結構的損傷,評估環境毒素風險。
七、技術優勢對比
傳統高爾基染色法與Rapid GolgiStain™ Kit的核心差異如下:
- 染色時間:傳統方法需6-8小時,本試劑盒僅需1.5-2小時。
- 樣本兼容性:傳統方法僅限冷凍切片,本試劑盒支持腦切片、培養細胞及活體組織。
- 信號穩定性:傳統染色結果1周內褪色,本試劑盒染色結果6個月無褪色。
- 操作復雜度:傳統方法需多步手工操作,本試劑盒提供標準化流程。
- 成本效益:傳統試劑種類繁多,本試劑盒一體化設計降低成本。
八、常見問題解答
Q1:染色后高爾基體信號弱怎么辦?
- 可能原因:固定時間過長或樣本脫片。
- 解決方案:縮短固定時間至15分鐘內,使用多聚賴氨酸預處理載玻片增強細胞貼壁。
Q2:背景染色過高如何解決?
- 可能原因:洗滌不夠或顯色時間過長。
- 解決方案:增加PBS漂洗次數至5次,嚴格控制顯色時間(≤15分鐘)。
Q3:封片后出現氣泡如何處理?
- 建議:使用移液槍輕吹封片劑表面,或延長封片固化時間至2小時。
九、供應信息
供貨商:上海起發
十、儲存與運輸
- 儲存條件:
- 試劑:2-8℃避光保存,避免冷凍。
- 封片劑:-20℃冷凍保存,運輸時需使用干冰。
- 運輸時效:
- 國內訂單:3個工作日內送達(順豐冷鏈)。
- 國際訂單:7-10個工作日(DHL國際快遞)。
十一、環保與安全
- 廢棄物處理:
- 含銀廢液需按《危險廢物名錄》分類收集,交由專業機構處理。
- 廢棄試劑瓶使用后需清洗,避免殘留污染。
- 生物安全:
- 操作活體樣本時需在生物安全柜內進行,遵循BSL-2級防護標準。
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(注:本文內容基于品牌公開資料及行業常規信息整理,具體以品牌信息文檔為準。)
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